免疫共沉淀

免疫共沉淀(Co-lmmunoprecipitation) 是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相
互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。

 其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被
保留了下來。如果用蛋白質X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。目前多用
精制的prorein A預先結合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應后，beads. 上的
prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于
確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。
基本流程是:細胞裂解液中加入抗體，與抗原形成特異免疫復合物，經過洗脫，收集免疫復合物，然
后進行SDS-PAGE及Western blotting分析。

 服務流程:
1.構建含有目的基因的表達質粒
2.共轉細胞
3.裂解細胞并加入誘餌蛋白的抗體,孵育
4.加入protein A或G以與抗體特異性結合于Agarose珠
5. SDS-PAGE; Western Blot