GPI錨定服務

技術介紹：

在真核生物中的GPI錨有一個共同的核心結構，該核心結構主要由以下幾部分組成：磷脂酰肌醇、葡糖胺、三個甘露糖(在釀酒酵母中是4個)和磷脂酰乙醇胺。其結構為（磷脂酰乙醇胺-6-甘露糖-α1-2-甘露糖-α1-6-甘露糖-1-4-氨基葡萄糖-α1-6-磷脂酰肌醇），這一結構在所有物種中都是保守的。其中，磷脂酰肌醇是合成GPI錨的起始分子，磷脂酰肌醇的sn-2位含有一個多不飽和脂肪酸，多不飽和脂肪酸取代羧基端的跨膜區而固定于質膜上。合成GPI錨前體后，通過磷脂酰乙醇胺連接位于細胞表面的蛋白質而形成GPI錨定蛋白。這里需要注意，GPI錨的結構在與蛋白質結合后及參與生物合成過程中會發生重構。GPI錨中側鏈及脂質基團因其結合的蛋白質隨著物種的不同而呈現多樣性。（GPI結構如上圖）

GPI錨組裝在內質網的膜小葉上。完成后，其被轉移至內腔，并將蛋白質的羧基末端連接至GPI錨。在跨膜轉運后，通過將磷脂酰肌醇脂質基團插入疏水脂質雙層中，GPI 錨定蛋白與細胞膜結合。一旦產生GPI 錨定蛋白，Man3-GlcN寡糖核心在從細胞分泌期間可經歷額外的糖基化修飾。

GPI 錨定蛋白的釋放可以通過用磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C（PLC-PI）（本公司可以訂購）處理來完成。該酶特異性地水解磷脂酰肌醇的磷酸二酯鍵，形成游離的1,2-二酰基甘油和糖肽結合的肌醇環-1,2磷酸鹽。如果肌醇被酰化，則不會發生酶促切割；需要用溫和的堿性條件進行預處理以除去脂肪酸基團。在酶促切割后，可以在用Triton® X-114（本公司可以訂購）處理膜之后，從不溶性沉淀/級分中回收GPI錨。從細胞膜中酶促釋放GPI錨可以觸發信號轉導的第二信使。

本司服務：

基于本公司較為成熟且很有優勢的蛋白質表達平臺，抗體制備平臺，噬菌體展示系統等科研平臺，根據您的需求，定制實驗計劃，包含各物種不同來源蛋白質與GPI的錨定服務，為您的研究提供便捷。

（下圖：GPI錨定詳細示意圖）