蛋白表達(dá)的幾種常用標(biāo)簽介紹

　　蛋白表達(dá)方法對(duì)于能否及時(shí)獲取所需數(shù)量和質(zhì)量的重z組蛋白非常關(guān)鍵。選擇了錯(cuò)誤的表達(dá)宿主可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊或低量表達(dá).缺少必要的翻譯后修飾或不適當(dāng)?shù)男揎?。選擇表達(dá)系統(tǒng)時(shí)需騎慮的因素包括蛋白質(zhì)的大小、二硫鍵的數(shù)目、所需翻譯后修飾的類型及目標(biāo)蛋自質(zhì)的定位。
 

　　蛋白表達(dá)的幾種常用標(biāo)簽介紹：
 

　　GST(谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶) 標(biāo)簽蛋白本身是一個(gè)在解毒過(guò)程中起到重要作用的轉(zhuǎn)移酶，它的天然大小為26KD。將它應(yīng)用在原核表達(dá)的原因大致有兩個(gè)，一是因?yàn)樗且粋€(gè)高度可溶的蛋白，希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性；另一個(gè)是它可以在大腸桿菌中大量表達(dá)，起到提高表達(dá)量的作用。
 

　　His6是指六個(gè)組氨酸殘基組成的融合標(biāo)簽，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當(dāng)某一個(gè)標(biāo)簽的使用，一是能構(gòu)成表位利于純化和檢測(cè)；二是構(gòu)成結(jié)構(gòu)特征(結(jié)合配體)利于純化。組氨酸殘基側(cè)鏈與固態(tài)的鎳有強(qiáng)烈的吸引力，可用于固定化金屬螯合層析(IMAC)，對(duì)重組蛋白進(jìn)行分離純化。
 

　　MBP(麥芽糖結(jié)合蛋白)標(biāo)簽蛋白大小為40kDa，由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細(xì)菌中過(guò)量表達(dá)的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBP標(biāo)簽可通過(guò)免疫分析很方便地檢測(cè)。有必要用位點(diǎn)專一的蛋白酶切割標(biāo)簽。如果蛋白在細(xì)菌中表達(dá)，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。
 

　　Flag標(biāo)簽蛋白為編碼8個(gè)氨基酸的親水性多肽(DYKDDDDK)，同時(shí)載體中構(gòu)建的Kozak序列使得帶有FLAG的融合蛋白在真核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)效率更高。
 

　　SUMO標(biāo)簽蛋白是一種小分子泛素樣修飾蛋白(Small ubiquitin-likemodifier)，是泛素(ubiquitin)類多肽鏈超家族的重要成員之一。